细胞培养中的污染监控与检测——真菌

上一篇文章中，我们说到如果在养细胞的过程中，如何判断细胞是否被细菌感染以及如何祛除细菌污染。

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细胞培养中的污染监控与检测——细菌

今天我们来讨论一下，细胞培养过程中的真菌感染。

二、真菌污染

真菌概述

真菌是一类具真核和细胞壁的异养生物。真菌可以通过孢子延续种群，典型的营养体为丝状分支结构。可污染细胞培养基的真菌种类繁多，最常见的有曲霉菌，白色念珠菌，酵母菌，黑霉菌，孢子菌等。

真菌污染症状

与其他污染相比，真菌污染更容易被观察到。具体表现为：

• 在培养基中会形成淡黄色或白色的漂浮物，肉眼可见，较易被发现

• 短期内培养液多不变混浊

• 显微镜下可以看见细胞之间或是培养基中，有纵横交错穿行的丝状，树枝状或管状菌丝

• 多数菌丝在高倍镜下可以观察到链状排列的菌株，而念珠菌及酵母菌菌株呈卵圆形，散落在细胞上及细胞周边生长。

真菌污染的鉴定

将待检测的细胞培养基，接种在真菌专用培养基上进行鉴定，例如：马丁培养基、沙氏培养基等。

真菌污染的处理方法

首先应尽快把污染细胞与其它细胞系隔离开，不要打开培养皿，以免孢子飞出；

同时需要对实验过程中所用的器材、试剂和操作空间做相应处理：消毒液喷洒、紫外线消毒、高温灭菌等；

高浓度的抗生素或是抗菌素（两性霉素 B 、泰乐菌素等）对细胞会产生一定毒性，在使用前可以进行剂量反应实验确定影响；

跟细菌污染的处理方法类似，通常情况下，霉菌污染的细胞，如果不是特别珍贵，建议直接丢弃。

如何预防支原体的污染

通常来说，被污染的细胞应该丢弃，以避免成为污染源。但对于珍贵的细胞，以往别的品牌的支原体清除剂，其实只是抑制剂，它们抑制支原体的DNA合成和蛋白合成，但无法杀除。是市面上一款具有杀灭作用的清除剂。它提取自枯草杆菌，可与支原体膜特异性结合，破坏膜通透性，导致支原体膨胀破裂而死。