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支原体污染的细胞都会出现哪些表现?

更新时间:2022-03-03  |  点击率:914

细胞培养被支原体污染是个世界性问题,在细胞培养中支原体感染发生率达到63%。支原体是一类无细胞壁,形态呈高度多形性,为圆形、丝状或梨形,其直径仅有0.13~0.18μm,变形能力大,故能通过滤菌器,突出的结构特征是没有细胞壁,对作用于细胞壁生物合成的抗生素不敏感。研究表明,支原体能耗尽营养物,促进代谢积累,导致pH改变,对细胞造成多种影响,包括生长状况、生化特性、代谢、免疫、以及细胞存活等多方面的改变,继而干扰实验结果,或造成无法解释的差异。更加不幸的是拯救被感染的细胞几乎是不可能的。

目前已知的主要污染源是动物血清、胰酶和已污染培养物的气溶胶,例如,猪鼻支原体通过胰酶,在消化细胞时进入细胞培养物,并造成污染。在原代细胞与传代细胞的检测中,原代细胞与传代细胞分离出支原体的频率是有明显差异的,传代次数越多的细胞,污染支原体的可能性就越大,这也是多次与动物血清、胰酶和已污染培养物的气溶胶接触后造成的,在原代细胞中,污染率低于4%,而传代细胞的污染率则高达57%~92%。

如何预防支原体的污染

通常来说,被污染的细胞应该丢弃,以避免成为污染源。但对于珍贵的细胞,以往别的品牌的支原体清除剂,其实只是抑制剂,它们抑制支原体的DNA合成和蛋白合成,但无法杀除。Mynox®是市面上一款具有杀灭作用的清除剂。它提取自枯草杆菌,可与支原体膜特异性结合,破坏膜通透性,导致支原体膨胀破裂而死。


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