如何提高细胞培养时的存活率

细胞培养技术的发现，使得很多研究不必局限于在动物或人体内进行，试验环境更为简单，目的更为明确，如：细胞内活动的基础研究；细胞与细胞相互作用；细胞与环境间的相互作用；遗传学与细胞转化；细胞产物和分泌等等。

细胞培养技术的发展很大程度上是由医学研究的需求而促进的，如：抗病毒疫苗的研究，肿瘤发生及治疗的研究；基因重组技术；单克隆抗体技术；组织工程；染色体分析等体外检测技术，以及体外辅助生殖技术。

在细胞培养过程中，除了细胞本身的生长特性，环境也会影响细胞的状态。

1：细胞生长的附着物或支持物性质（如：细胞培养瓶/板或细胞培养载体）；

2：细胞培养基的理化性质和成分；

3：气相成分；

4：培养温度等。合适的培养环境才可以使细胞表现出特定的功能。

无论是原代培养还是细胞系的传代培养，都要定期更换培养基。而传代培养过程中，细胞通常遵循一种标准的方式生长：接种后经过一段潜伏期进入指数生长期，即对数期，在这一阶段细胞的生长状态最好。此后细胞密度将逐渐增加到铺满整个细胞培养板/皿/瓶有效基质，当细胞浓度超出培养基的能力时，细胞生长速度将大大减慢，这时可以选择更换培养液或进行分瓶培养，也就是传代。悬浮细胞培养由于机械力保持细胞在悬浮状态，培养和传代过程也不需要胰蛋白酶消化，但是无论哪种情况，都有相似的生长周期。

细胞培养成功的关键因素：

1.要保证无菌,包括无菌操作,无菌环境.枪头等要及时灭菌,培养瓶,移液管最好使用一次性的,如果你的细胞比较不好养,最好使用一次性的.
2.要传代的时候细胞传代的数量不能太少,否则细胞不容易养活.另外,传代不要过度频繁,即使是肿瘤细胞.
3.不要经常用胰酶消化细胞,且消化时间不要过长.
4.根据细胞生长情况,即使更换新鲜培养基.
5.血清一般要冻存在-20摄氏度,用的时候在4摄氏度融化,不要反复冻存,最好用10ml的离心管分装使用.

科研实验中，细胞的体外培养一直是一个重要环节。细胞要养好，就要用好血清，如Ausbian®特级胎牛血清，它适合各种细胞培养，尤其适合难养细胞，如：干细胞、肝细胞，神经细胞，原代培养、细胞融合、转染细胞等。